Introducción a las máquinas de PCR.

máquina de PCR, también conocido como instrumento de amplificación de genes por PCR, instrumento de amplificación por PCR, instrumento de amplificación de ácidos nucleicos por reacción en cadena de la polimerasa, es un instrumento que amplifica ADN específico utilizando tecnología de PCR (reacción en cadena de la polimerasa).La máquina de PCR se usa ampliamente en laboratorios médicos y biológicos, por ejemplo, para determinar si un organismo de prueba exhibirá un perfil de enfermedad genética, para diagnosticar enfermedades infecciosas. enfermedades, replicar genes e identificar parentesco.¿Qué es una máquina de PCR?

Aquí está la lista de contenidos:

l La estructura básica de una máquina de PCR.

l Principio de funcionamiento de la máquina de PCR.

l Cinética de reacción de las máquinas de PCR.

La estructura básica de una máquina de PCR.

Una máquina de PCR generalmente consta de una parte de cubierta caliente, una parte de ciclo térmico, una parte de transmisión, una parte de control y una parte de suministro de energía, etc.

Principio de funcionamiento de la máquina de PCR.

El principio de funcionamiento del máquina de PCR Es similar al proceso de replicación natural del ADN, cuya especificidad depende de cebadores oligonucleotídicos complementarios a ambos extremos de la secuencia diana, y consta de tres pasos de reacción básicos: desnaturalización-hibridación-extensión.

1. Desnaturalización del ADN molde.

El ADN molde se calienta a aproximadamente 93°C durante un tiempo determinado para disociar el ADN molde bicatenario o el ADN bicatenario formado por una máquina de PCR para convertirlo en monocatenario de modo que pueda unirse a los cebadores en preparación para la siguiente ronda de reacción.

2. Recocido (desnaturalización) de ADN molde y cebadores

Después de que el ADN molde se desnaturaliza en monocatenario mediante calentamiento, la temperatura se reduce a aproximadamente 55 °C y los cebadores se emparejan y unen a la secuencia complementaria monocatenaria del ADN molde.

3. Ampliación de cebadores

El conjugado plantilla-cebador de ADN se sintetiza bajo la acción de la ADN polimerasa Taq, utilizando dNTP como material de reacción y la secuencia diana como plantilla, para sintetizar una nueva hebra replicada semiconservada complementaria a la hebra de ADN plantilla según el principio de base. -emparejamiento y replicación semiconservada.

Al repetir el proceso de desnaturalización-recocido-extensión, se pueden obtener más 'cadenas replicadas semiconservadas' y estas nuevas cadenas se pueden utilizar como plantillas para el siguiente ciclo.

La máquina de PCR tarda entre 2 y 4 minutos en completar cada ciclo, y así sucesivamente, el ADN producido en cada ciclo puede convertirse en la plantilla para el siguiente ciclo, y cada ciclo amplifica el número de copias de la región específica del ADN entre dos cebadores sintéticos en 1. -veces, y el producto de la máquina de PCR se amplifica rápidamente en la forma exponencial de 2. Después de 25~30 ciclos (2~3 horas), la máquina de PCR teóricamente puede amplificar el gen más de 109 veces después de 25~30 rondas (2~ 3 horas), y en la práctica, generalmente puede alcanzar entre 106 y 107 veces.

Cinética de reacción de la máquina de PCR.

Los tres pasos de reacción de la máquina de PCR se repiten, lo que resulta en un aumento exponencial en la cantidad de amplificación del ADN.La amplificación final del ADN de la reacción se puede calcular usando y=(1+X) n.Y representa el número de copias del fragmento de ADN amplificado, X representa la eficiencia de amplificación promedio por amplificación y n representa el número de ciclos.El valor teórico de la eficiencia de amplificación promedio es del 100%, pero en la etapa inicial de la reacción real, el aumento del fragmento de ADN de la secuencia objetivo es exponencial y con la acumulación gradual de productos de la máquina de PCR, el fragmento de ADN amplificado ya no aumenta. exponencialmente, pero entra en el período de crecimiento lineal o período estacionario, es decir, el 'efecto de estancamiento', de modo que la eficiencia promedio de la máquina de PCR alcanza el valor teórico.

Bioteke Corporation, que se centra en el diagnóstico molecular y la detección rápida, en particular en la extracción de ácidos nucleicos, es un fabricante profesional de alta tecnología y máquinas de PCR.Está ambientado en la ciudad de Wuxi, provincia de Jiangsu, China.Por lo tanto, esperamos cooperar con usted.