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Introducción a las máquinas PCR.

Número Navegar:0     Autor:Editor del Sitio     publicar Tiempo: 2021-11-08      Origen:motorizado

Introducción a las máquinas PCR.

Máquina de PCR, también conocido como instrumento de amplificación de genes PCR, instrumento de amplificación por PCR, instrumento de amplificación de ácido de ácido de la reacción de la cadena de la polimerasa, es un instrumento que amplifica el ADN específico utilizando la tecnología PCR (reacción en cadena de la polimerasa). La máquina de PCR se usa ampliamente en laboratorios médicos y biológicos, como para determinar si un organismo de prueba exhibirá las máquinas de PCR se usan ampliamente en los laboratorios médicos y biológicos, por ejemplo, para determinar si un organismo de prueba exhibe un perfil de enfermedad genética, para diagnosticar infecciosos. Enfermedades, para replicar los genes e identificar la paternidad. ¿Qué es una máquina PCR?

Aquí está la lista de contenido:

l La estructura básica de una máquina PCR.

l principio de trabajo de la máquina PCR

l Cinética de reacción de las máquinas PCR.


La estructura básica de una máquina PCR.

Una máquina de PCR generalmente consiste en una parte de cubierta caliente, una parte de ciclo térmico, una parte de transmisión, una parte de control y una parte de suministro de energía, etc.

Principio de funcionamiento de la máquina PCR

El principio de funcionamiento de laMáquina de PCREs similar al proceso de replicación natural del ADN, cuya especificidad depende de los cebadores de oligonucleótidos complementarios a ambos extremos de la secuencia de destino, y consta de tres pasos de reacción básicos: desnaturalización-recocido-extensión.

1. Denaturación de la plantilla ADN.

El ADN de la plantilla se calienta a aproximadamente 93 ° C durante un tiempo determinado para disociar el ADN de la plantilla de doble cadena o el ADN de doble cadena formado por una máquina PCR para hacerlo de manera única para que pueda unirse a los cebadores en preparación para La siguiente ronda de reacción.

2. Recocido (desnaturalización) de ADN de plantilla y cebadores.

Después de que el ADN de la plantilla se desnaturaliza en un simple cadena mediante el calentamiento, la temperatura se reduce a aproximadamente 55 ° C y los cebadores están emparejados y vinculados a la secuencia complementaria única de la plantilla ADN.

3. Extensión de los cebadores.

La plantilla de ADN-Primer conjugado se sintetiza bajo la acción de la polimerasa TaqDna, utilizando DNTP como el material de reacción y la secuencia de destino como plantilla, para sintetizar una nueva cadena replicada semi-conservada complementaria a la cadena de ADN de la plantilla de acuerdo con el principio de la base. -Pairing y replicación semi-conservada.

Al repetir el proceso de desnaturalización-recocido-extensión, se pueden obtener más \"Cadenas de replicación semi-conservadas\", y estas nuevas cadenas se pueden usar como plantillas para el próximo ciclo.

La máquina PCR toma 2 ~ 4 minutos para completar cada ciclo, y así sucesivamente, el ADN producido en cada ciclo puede convertirse en la plantilla para el siguiente ciclo, y cada ciclo amplifica el número de copia de la región específica de ADN entre dos cebadores sintéticos por 1 -Pollar, y el producto de la máquina de PCR se amplifica rápidamente en la forma exponencial de 2. Después de 25 ~ 30 ciclos (2 ~ 3 horas), la máquina PCR puede amplificar teóricamente el gen más de 109 veces después de 25 ~ 30 rondas (2 ~ 3 horas), y en la práctica, generalmente puede alcanzar los 106 ~ 107 veces.

Cinética de reacción de la máquina PCR.

Los tres pasos de reacción de laMáquina de PCRse repiten, lo que resulta en un aumento exponencial en la cantidad de amplificación de ADN. La amplificación final de ADN de la reacción se puede calcular utilizando y = (1 + x) n. Y representa el número de copias del fragmento de ADN amplificado, X representa la eficiencia de amplificación promedio por amplificación, y n representa el número de ciclos. El valor teórico de la eficiencia de amplificación promedio es del 100%, pero en la etapa temprana de la reacción real, el aumento del fragmento de ADN de secuencia diana es exponencial, y con la acumulación gradual de productos de la máquina PCR, el fragmento ADN amplificado ya no aumenta Exponencial, pero ingresa al período de crecimiento lineal o el período estacionario, es decir, el \"efecto de estancamiento\", de modo que la eficiencia promedio de la máquina PCR alcanza la eficiencia promedio de la máquina PCR no alcanza el valor teórico.

BIETEKE CORPORATION, que se centra en el diagnóstico molecular y la detección rápida, en particular, en la extracción de ácido nucleico, es un fabricante profesional de alta tecnología y máquinas PCR. Se encuentra en la ciudad de Wuxi, provincia de Jiangsu, China. Entonces, esperamos cooperar con usted.

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